植物組織水勢的測定實(shí)驗報告
一、實(shí)驗目的和要求
了解植物組織中水分狀況的另一種表示方法及用于測定的方法和它們的優(yōu)缺點(diǎn)。
二、實(shí)驗原理
小液流法測定新鮮白蘿卜的組織水勢。植物細胞是一個(gè)滲透系統。當組織水勢低于溶液滲透勢,組織吸水,溶液變濃,比重增加,小液流下沉。當組織水勢高于溶液滲透勢,組織失水,溶液變稀,比重下降,小液流上浮。當組織水勢等于溶液滲透勢,組織與溶液達到水分進(jìn)出動(dòng)態(tài)平衡,溶液濃度和比重不變,小液流不動(dòng)。
壓力室法測定海桐葉片組織水勢,植物葉片通過(guò)蒸騰作用產(chǎn)生蒸騰拉力。導管中的水分由于內聚力的作用而形成連續的水柱。因此,對于蒸騰著(zhù)的植物,其導管中的水柱由于蒸騰拉力的作用,使水分連貫地向上運輸。當葉片或枝條被切斷時(shí),木質(zhì)部中的液流由于張力解除迅速縮回木質(zhì)部。將葉片裝入壓力室鋼筒,切口朝外,逐漸加壓,直到導管中的液流恰好在切口處顯露時(shí),所施加的壓力正好抵償了完整植株導管中的原始負壓。
三、主要儀器設備
小液流法:白蘿卜、打孔器、10ml離心管、小刀、鑷子、注射器、1mol/L蔗糖溶液、甲基橙 壓力室法:壓力室
四、操作方法和實(shí)驗步驟
小液流法:
1、用1mol/l的蔗糖溶液配制0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50M一系列不同濃度的蔗糖溶液(10mL),用力混勻。
2、分別取4ml不同濃度的溶液到另一組相應的試管中。每管加入厚度約為1mm的蘿卜圓片,加塞放置30min。期間晃動(dòng)(3-4次)。
3、用針蘸取少量甲基橙放入每支試管,混勻。
4、用注射器取少許黃色溶液,伸入對應濃度的蔗糖溶液中部,緩慢擠出一滴小液滴,觀(guān)察小液滴移動(dòng)方向并記錄。
Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+toC) ×濃度
壓力室法:
根據植物材料選取枝條(或葉片)型的`壓力室蓋→將試樣裝入壓力室蓋的孔(或槽)中夾緊,壓入壓力室并順時(shí)針旋轉緊固。打開(kāi)鋼瓶閥門(mén),使控制閥朝向加壓,緩慢打開(kāi)測定閥,使加壓速率達0.1bar,仔細觀(guān)察伸出壓力室蓋的植物樣品,一發(fā)現木質(zhì)部轉濕潤液體溢出,立即關(guān)閉測定閥,記錄壓力表讀數。
組織Ψw(Mpa) = -0.1×壓力室壓力表讀數
五、實(shí)驗數據記錄和處理
小液流法測定結果:
其他兩個(gè)小組的實(shí)驗結果:
根據公式計算得到蘿卜組織液濃度
Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+t℃) ×濃度= -0.0083×(273+16 ) ×0.1=-0.240Mpa
蘿卜組織液濃度約為0.1mol/L,水勢約為-0.240Mpa
壓力室法測定結果:
室溫16℃,測出出水壓力讀數為13,水勢 -1.3Mpa
六、實(shí)驗結果與分析
1、比較多組的實(shí)驗結果發(fā)現,各組實(shí)驗數據差別較大,經(jīng)分析認為通過(guò)小液流法測量的水勢誤差較大。
2、經(jīng)分析認為蘿卜切片厚薄和總質(zhì)量不同、在空氣中放置的時(shí)間不同、蘿卜片在溶液中的放置時(shí)間不同,均有可能造成小液流法實(shí)驗數據的偏差。
3、通過(guò)小液流法測得的植物組織水勢只是一個(gè)范圍,如要得到更精確的實(shí)驗結果,需要縮小梯度之間的濃度差,在0.5mol/L~0.2 mol/L之間設多個(gè)測量點(diǎn)。
七、討論、心得
1、因為小液流法的人為因素誤差較大,所以蘿卜切片須盡量使大小厚薄均勻,切好后盡快同時(shí)放入到六個(gè)試管中,以減少人為誤差。
2、由于蘿卜和外界溶液滲透達到平衡需要一定的時(shí)間,所以將蘿卜放入溶液后等待的時(shí)間不能過(guò)短,否則會(huì )引起實(shí)驗誤差,將蘿卜切成薄片也是為了加快滲透作用。
3、使用注射器向原榮業(yè)中加入黃色的滲透平衡溶液時(shí),應緩慢加入少量即可,如加入太快,會(huì )黃色溶液從針頭向下噴出,會(huì )對液流運動(dòng)方向的觀(guān)察造成影響。
4、用壓力室法測定植物的水勢,可以直接從壓力表上讀出水勢的數值,實(shí)驗結果直觀(guān),但是也存在一些缺點(diǎn),判斷水剛從切面滲出難度較大,同時(shí)該實(shí)驗方法儀器要求較高,且測量值受到環(huán)境氣壓的影響。
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