森林保護教學(xué)形式創(chuàng )建的農科論文
本實(shí)驗在2個(gè)方面體現創(chuàng )新設計:
(1)走出課堂,面向林業(yè)生產(chǎn)實(shí)際。從生產(chǎn)中發(fā)現問(wèn)題,獲取的實(shí)驗材料,更具針對性,理論與實(shí)踐緊密結合,增強了學(xué)生的興趣和參與意識。
(2)實(shí)驗材料多樣性,根據農林高校生源多來(lái)自農村、學(xué)生獲取植物材料較容易的特點(diǎn),每小組采集的材料來(lái)自不同生態(tài)區域,實(shí)驗結果豐富多樣,學(xué)生組別間可相互學(xué)到更多的知識,提高了學(xué)習效率。
實(shí)驗學(xué)時(shí)與安排
本實(shí)驗具有季節性、綜合性和持續性的特點(diǎn),選擇在春季5~7月,實(shí)驗總學(xué)時(shí)15學(xué)時(shí),分5次進(jìn)行,每次教學(xué)指導20min,采用小結實(shí)驗進(jìn)度和答疑方式。學(xué)生查閱資料、編制方案及實(shí)驗報告不計入學(xué)時(shí),根據報告內容和新穎性推薦發(fā)表。
實(shí)驗方法
1樣品采集與前處理
學(xué)生實(shí)驗前按5人1組分組,通過(guò)社會(huì )實(shí)踐或生源地了解林木病害發(fā)生情況,實(shí)地采集或郵寄林木病害分離用標本,并填寫(xiě)好“林木病害調查記載卡(見(jiàn)圖1)”。記載卡記錄病害發(fā)生的生態(tài)環(huán)境因子、林地管理情況,對分析發(fā)病原因至關(guān)重要。采集標本注上標記后,如不能及時(shí)分離,要用塑料袋分類(lèi)裝好,冰箱中低溫保存備用以防樣品變質(zhì)。
2培養基制作培養
不同的病原菌,要根據它們的需求配制適宜的培養基,對營(yíng)養有特殊要求的病原菌還要配制特定的選擇性培養基。培養基的種類(lèi)很多,截至1930年,已經(jīng)報道了將近2500種。學(xué)生要對所診斷的病害性質(zhì)有一基本了解,如真菌病害或細菌病害,選擇適宜培養基制作。因此,同學(xué)們在實(shí)驗設計時(shí)應選擇馬鈴薯葡萄糖瓊膠培養基分離真菌或肉汁凍培養基分離細菌。由于該步驟要加熱和高壓蒸汽滅菌,有一定危險性,除安全教育外,還要求學(xué)生不能在滅菌期間離開(kāi)實(shí)驗室。馬鈴薯葡萄糖瓊膠培養基制作時(shí),先將洗凈后去皮的馬鈴薯200g切碎,加水1000ml煮沸0.5h,用紗布濾去馬鈴薯,再加水補足1000ml;然后加葡萄糖或蔗糖10~20g和瓊膠17~20g,加熱使瓊膠完全熔化后,趁熱用紗布或脫脂棉過(guò)濾,或者用濾紙和保溫漏斗過(guò)濾。而后分裝試管,加棉花塞后滅菌。作平板培養的每管約10ml,作斜面培養的則每管約5ml。根據工作需要,還可以分裝在三角瓶中滅菌。
教師必須在實(shí)驗前說(shuō)明,高壓滅菌器的用法和注意事項:
(1)滅菌器中的水,應加水到指定的標度;
(2)需要滅菌的器物放在滅菌器內,將蓋密閉,打開(kāi)氣門(mén);
�。�3)加熱,等空氣完全排除后(蒸汽從氣門(mén)有力地沖出),關(guān)閉氣門(mén);
(4)當壓力上升到所需要的指標后,開(kāi)始計算滅菌的時(shí)間,滅菌過(guò)程中保持壓力不變;
(5)達到需要滅菌的時(shí)間,停止加熱,稍微打開(kāi)氣門(mén),排出蒸汽使壓力慢慢下降;(6)當壓力降到內外相等時(shí),才能打開(kāi)高壓滅菌器的蓋。肉汁凍培養基的方法:取3g牛肉浸膏,蛋白胨5~10g,瓊膠17~20g,水1000ml,與馬鈴薯葡萄糖瓊膠培養基的方法相同,這里不再贅述。
3分離培養
(1)超凈工作臺清毒與分離材料的選擇。分離和培養應該在很清潔的條件下進(jìn)行。打開(kāi)超凈工作臺紫外燈滅菌30min,殺死空氣中的微生物,關(guān)燈5~10min,再進(jìn)行分離。
(2)組織分離法分離真菌。病原真菌的分離一般都是用組織分離法[3],是林學(xué)、森保專(zhuān)業(yè)學(xué)生必須掌握的技術(shù)。要求學(xué)生從上述采集的標本中,選擇新近發(fā)病的植株、器官或組織作為分離的材料,可以減少腐生菌的污染。腐生菌容易在生病很久而已經(jīng)枯死或敗壞的部分滋生,所以一般斑點(diǎn)病害應該從鄰近健全的組織的部分分離。在超凈工作臺上,從病斑切取每邊約5mm的小塊病組織,用70的酒精浸幾秒鐘,再在0.1的酸性升汞水溶液中浸3~5min;而后用滅菌水換洗3次,將其移置在上述馬鈴薯葡萄糖瓊膠培養基平板上培養。用蠟筆在培養皿上注明分離材料日期后送入25℃溫箱反轉培養皿培養;3~5d,在培養基上選擇純的菌落,移植到新的平面上或斜面上培養并純化,并計算各分離真菌百分率。以?xún)?yōu)勢菌群作為回接實(shí)驗菌種。
(3)平板劃線(xiàn)分離法分離細菌。平板劃線(xiàn)法[3]是分離細菌的.常見(jiàn)方法,取小塊病組織,經(jīng)過(guò)表面消毒和滅菌水洗過(guò)2次以后,放在滅菌載玻片上的滅菌水中,用滅菌玻棒研碎。靜置一定時(shí)間,用滅菌的移植環(huán)蘸取以上組織液在肉汁凍培養基瓊膠平板上劃線(xiàn)培養;先在平板的一側順序劃3~5條線(xiàn),再將培養皿轉60°,將移植環(huán)滅菌后,從第2條線(xiàn)末端,順序劃出3~5條線(xiàn)。也有其他劃線(xiàn)的形式,如4分劃線(xiàn)和放射劃線(xiàn)等,目的都是使細菌分開(kāi)形成分散的菌落,并計算各分離細菌百分率,以?xún)?yōu)勢菌群作為回接實(shí)驗菌種。
4病原回接與再分離
病害的種類(lèi)很多,其傳染方式也各不相同,因此要用相應的接種方法。種子、土壤、氣流和昆蟲(chóng)等傳染的病害,接種方法是不同的。因此,指導老師要求學(xué)生在進(jìn)行試驗前,對一種病害在自然條件下的傳染方式和侵染途徑有所了解。一般氣流和雨水傳播病害較普遍,可采用噴霧法進(jìn)行。將上述真菌孢子(或菌絲)懸浮液噴灑在寄主表面,并用濕紗布保濕3d,病菌可以從氣孔、傷口或表皮直接侵入。影響接種試驗的因子包括病原物的致病性和致病力、接種植物的抗病性和感病性和發(fā)病的環(huán)境條件。在接種時(shí),應盡量模仿接種菌在自然條件下,侵染寄主時(shí)的環(huán)境條件,特別要注意溫度和濕度對接種發(fā)病的影響。學(xué)生在回接后,每隔2~3d觀(guān)察病害發(fā)生情況并與自然狀態(tài)比較,等出現顯著(zhù)癥狀后按上述方法能再次分離到用來(lái)回接的病原,否則實(shí)驗失敗。
5病原鑒定與病因分析
(1)病原真菌:以形態(tài)學(xué)特征[4]為主,結合分子生物學(xué)[5]鑒定種群。
(2)病原細菌:形態(tài)、生理生化結合分子生物學(xué)[6]鑒定種群。實(shí)驗要求學(xué)生根據優(yōu)勢菌群、回接試驗情況與采樣地環(huán)境狀態(tài)分析發(fā)病因素,寫(xiě)出實(shí)驗報告,并進(jìn)行課程討論。
6創(chuàng )新實(shí)驗設計小結
本創(chuàng )新實(shí)驗流程簡(jiǎn)單總結為:在采樣及前處理基礎上,完成“分離、接種、再分離”的技術(shù)規程。
(1)分離:從病組織上分離病原物并進(jìn)行純培養;(2)接種:用純培養物接種到相同的健康植物上,給予適宜發(fā)病條件,觀(guān)察是否引起原來(lái)相同的病害;(3)再分離:從接種后發(fā)病的植物上,能分離到與用來(lái)接種的病原物。
結束語(yǔ)
實(shí)驗設計15學(xué)時(shí),分5階段完成,占森林保護系列實(shí)驗近一半學(xué)時(shí),實(shí)驗綜合運用《林木病理學(xué)》、《林木病害研究方法》、《微生物學(xué)》、《分子生物學(xué)技術(shù)》等課程內容,屬于我校綜合型實(shí)驗、探索型實(shí)驗、研究型實(shí)驗的代表,是理論基礎與面向林業(yè)生產(chǎn)相結合的有效形式,這種創(chuàng )新實(shí)驗方式應是高等農業(yè)院校教學(xué)實(shí)踐[7-8]的發(fā)展方向。通過(guò)該實(shí)驗同學(xué)們在實(shí)施前主動(dòng)利用課余、假期社會(huì )實(shí)踐活動(dòng),了解生產(chǎn)中亟待解決的林木病害問(wèn)題,為實(shí)驗設計開(kāi)展前期工作,目的性、針對性強。本實(shí)驗已實(shí)施5年,涉及林學(xué)、園林及觀(guān)園專(zhuān)業(yè)學(xué)生。目前有30名學(xué)生的實(shí)驗報告作為林木病害診斷書(shū)提供給了地方林業(yè)部門(mén)作為制定防治方案的決策依據,有15名學(xué)生的實(shí)驗論文已正式發(fā)表。學(xué)生在實(shí)驗報告和課程討論中總結到:“人工誘發(fā)診斷技術(shù)是學(xué)好《森林保護系列實(shí)驗》和《林木病理學(xué)》課程的綜合體現,通過(guò)實(shí)驗,不僅提高了自己的實(shí)踐操作能力,而且解決了一些生產(chǎn)的實(shí)際問(wèn)題,很有成就感”。作為指導實(shí)驗的教師在豐富了教學(xué)內容的同時(shí),獲得了更多科學(xué)研究素材,實(shí)現了學(xué)與教的雙贏(yíng)。
【森林保護教學(xué)形式創(chuàng )建的農科論文】相關(guān)文章：
閱讀生活，感悟生活，創(chuàng )建課文教學(xué)新形式(必修教學(xué)論文)12-06
農科城科技創(chuàng )新論文11-03
工業(yè)工程教學(xué)規劃及創(chuàng )建的論文07-30
山區林業(yè)發(fā)展的建設與開(kāi)發(fā)農科論文02-02
集體交流形式的教學(xué)初探論文01-22
課堂環(huán)境下語(yǔ)言形式的教學(xué)論文07-05