細胞生物學(xué)實(shí)驗報告
隨著(zhù)個(gè)人的素質(zhì)不斷提高,報告不再是罕見(jiàn)的東西,多數報告都是在事情做完或發(fā)生后撰寫(xiě)的。你還在對寫(xiě)報告感到一籌莫展嗎?下面是小編為大家收集的細胞生物學(xué)實(shí)驗報告,僅供參考,歡迎大家閱讀。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告1
一、實(shí)驗目的:
1、掌握顯示細胞中過(guò)氧化物酶反應的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細胞的形態(tài)學(xué)檢測方法
二、實(shí)驗原理:
1、細胞內的過(guò)氧化物酶能把許多胺類(lèi)氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標本,細胞內的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍,進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據顏色反應來(lái)判定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍色聯(lián)苯胺是不穩定的,無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下,遵循自身的程序,自己結束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過(guò)程。
3、凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀(guān)察是檢測細胞凋亡的一種直觀(guān)、可靠的方法。
三、實(shí)驗步驟:
細胞中過(guò)氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;
2、取骨髓細胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開(kāi)股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開(kāi)的小孔中,摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上;
3、涂片:用另一玻片將骨髓細胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi),室溫晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿(mǎn)涂片為宜,處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應6分鐘(以蓋滿(mǎn)涂片為宜)6、清水沖洗,番紅復染2min。
7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀(guān)察,后換高倍鏡下觀(guān)察(油鏡100×)
細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀(guān)察吉姆薩染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。吖啶橙染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀(guān)察。
四、結果與分析:
1、根據隨機選擇的幾個(gè)視野的統計,該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)
五、思考題:
1、細胞凋亡的調控機制
細胞凋亡是一個(gè)受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動(dòng)自殺過(guò)程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。
2、細胞凋亡的特征
凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細胞凋亡的方法
定性的研究方法:常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀(guān)察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)
定量或半定量的研究方法:各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
細胞生物學(xué)實(shí)驗報告2
一、實(shí)驗目的:
1、通過(guò)對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學(xué)顯微鏡觀(guān)察,了解細胞的`形態(tài)及其顯微結構;
2、學(xué)習顯微測量的方法,對細胞的大小有一直觀(guān)認識。
二、實(shí)驗材料和儀器:
小白鼠肝細胞切片;雞血紅細胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測微尺;鏡臺測微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實(shí)驗步驟:
(一)細胞形態(tài)觀(guān)察
l、動(dòng)物細胞的觀(guān)察
。1)人肝細胞切片:在顯微鏡下仔細觀(guān)察肝細胞的形態(tài)構造。
。2)雞血細胞涂片的觀(guān)察:觀(guān)察血細胞的組成;紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細胞的觀(guān)察
取蠶豆葉片橫切片的觀(guān)察:注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。
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1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好,使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺測微尺和轉動(dòng)目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊,可轉動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調焦),使兩尺左邊的一直線(xiàn)重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線(xiàn)。
4、記錄兩條重合線(xiàn)間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm:
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的格數
四、實(shí)驗結果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量:
五、作業(yè)與思考:
1、血細胞按含量高低,主要含有:紅細胞,白細胞,血小板。
白細胞最大,紅細胞次之,血小板最小。紅細胞:主要的功能是運送氧。 白細胞:主要扮演了免疫的角色,當病菌侵入人體時(shí),白細胞能穿過(guò)毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過(guò)程中起著(zhù)重要作用。細胞形態(tài)見(jiàn)下圖。
2、植物細胞一般比動(dòng)物細胞大一些。形態(tài)圖見(jiàn)下。
3、在不同放大倍數下,測定的細胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測量準確。
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