生物實(shí)驗報告(集合15篇)
在經(jīng)濟飛速發(fā)展的今天，報告有著(zhù)舉足輕重的地位，多數報告都是在事情做完或發(fā)生后撰寫(xiě)的。我們應當如何寫(xiě)報告呢？以下是小編收集整理的生物實(shí)驗報告，歡迎大家分享。
生物實(shí)驗報告1
實(shí)驗日期： 年月 日
組長(cháng)： 組員：
一、實(shí)驗要求
1、練習使用顯微鏡，學(xué)習規范的操作方法。
2、能夠獨立操作顯微鏡。
3、能夠將玻片標本移動(dòng)到視野中央，并看到清晰的圖像。
二、實(shí)驗原理
三、材料用具
顯微鏡，寫(xiě)有“上”字的玻片，動(dòng)物、植物玻片標本，擦鏡紙，紗布。
四、方法與步驟
�。ㄒ唬┤＄R和安放
1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座
2、把顯微鏡放在實(shí)驗臺上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
�。ǘ⿲�
3、轉動(dòng)轉換器，使低倍物鏡對準通光孔（物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離）。
4、把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內（右眼睜開(kāi)，便于以后同時(shí)畫(huà)圖）。轉動(dòng)反光鏡，使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡，以看到白亮的視野。
�。ㄈ┯^(guān)察
5、把所要觀(guān)察的玻片標本（也可以用印有“e”字的薄紙片制成）放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。
6、轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼睛看著(zhù)物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。
7、左眼向目鏡內看，同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
注意事項：
1、實(shí)驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動(dòng)轉換器，把兩個(gè)物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，
生物實(shí)驗報告2
生物學(xué)是一門(mén)實(shí)驗科學(xué)。生物新課程倡導面向全體學(xué)生、提高生物科學(xué)素養和探究性學(xué)習的課程理念。其中探究學(xué)習是讓學(xué)生在主動(dòng)參與的過(guò)程中進(jìn)行學(xué)習，讓學(xué)生在探究問(wèn)題的活動(dòng)中獲取知識，了解科學(xué)家的工作方法和思維方法，學(xué)會(huì )科學(xué)研究所需要的各種技能，領(lǐng)悟科學(xué)觀(guān)念，培養科學(xué)精神。這種學(xué)習的方式的中心是針對問(wèn)題的探究活動(dòng)，當學(xué)生面臨各種讓他們困惑的問(wèn)題時(shí)，他就要想法尋找答案。
在解決問(wèn)題時(shí)，要對問(wèn)題進(jìn)行推理、分析，找出問(wèn)題解決的方向，然后通過(guò)觀(guān)察、實(shí)驗來(lái)收集事實(shí)，通過(guò)對獲得的資料進(jìn)行歸納、比較、統計分析，形成對問(wèn)題的解釋。最后通過(guò)討論和交流進(jìn)一步澄清事實(shí)，發(fā)現新的問(wèn)題，對問(wèn)題進(jìn)行更深入的研究。
在此背景理念依據下，在教學(xué)中教學(xué)模式也將發(fā)生根本的改變，生物課將更多地開(kāi)展學(xué)生的試驗、討論、交流等活動(dòng)。引導學(xué)習教學(xué)模式就是在這種背景下構建的。具體的模式結構：?jiǎn)?wèn)題——閱讀、實(shí)驗——分析、推理、歸納、討論——結論。
在運用這種模式的過(guò)程中我有下面幾點(diǎn)感觸：
1、在教師的引導下學(xué)生可帶者問(wèn)題去閱讀、分析、討論資料，達到解決問(wèn)題的目的。比如：在學(xué)習〈空中飛行的動(dòng)物〉時(shí)，教師可這樣引導學(xué)生；想一想，我們人要想在天空自由自在的飛翔必須先解決什么問(wèn)題？
學(xué)生思考后說(shuō)；一是，解決了動(dòng)力問(wèn)題。二是，解決了地心引力問(wèn)題。教師隨后提出問(wèn)題：鳥(niǎo)是如何解決這些問(wèn)題的？引導學(xué)生思考，讓學(xué)生帶著(zhù)問(wèn)題去看書(shū)、閱讀、討論、交流、的出結論。這樣既可提高學(xué)生的學(xué)習興趣，改變學(xué)習方式，又符合新課程的要求。
2、合理開(kāi)發(fā)的有效地利用一切可以利用的課程資源是實(shí)現課程目標，轉變學(xué)生學(xué)習方式的關(guān)鍵條件。知識、技能、經(jīng)驗、活動(dòng)方式方法等都是課程資源。在學(xué)習〈水中生活的動(dòng)物〉時(shí)，對于生活在我這些地方的學(xué)生來(lái)說(shuō)，對水中的動(dòng)物了解不多，而且上課時(shí)還不能做試驗，學(xué)生缺少感性的認識，這時(shí)教師就要引導學(xué)生開(kāi)發(fā)自己已有的課程資源。如：學(xué)習魚(yú)鰭的作用時(shí)引導學(xué)生想想：獨槳船和雙槳船他們的槳各起什么作用？在學(xué)習魚(yú)兒離開(kāi)水為什么會(huì )死？教師可引導學(xué)生回憶：頭發(fā)在水中水什么樣的？從水中出來(lái)時(shí)又是什么樣的？這樣就很容易理解知識，解決了問(wèn)題。
3、信息化是當今世界經(jīng)濟和社會(huì )發(fā)展的大趨勢。新課程注重現代信息技術(shù)與生物新課程的整合。這樣可有效地應用數字化的優(yōu)勢達到學(xué)習目標。教師用編制成的演示文稿、多媒體課件來(lái)引導學(xué)生學(xué)習或作為學(xué)生自主學(xué)習的資源。
在課程學(xué)習中，利用諸多的文字處理、圖形圖像處理、信息集成等工具，讓學(xué)生對課程學(xué)習內容進(jìn)行重組、創(chuàng )作，不僅使學(xué)生獲得知識，而且能夠幫助學(xué)生建構知識。但是，教師在制作多媒體課件時(shí)，把每個(gè)知識點(diǎn)、每個(gè)環(huán)節設計的過(guò)于完美，在教師的引導下學(xué)生很簡(jiǎn)單的就可掌握知識，完成教學(xué)任務(wù)。但也存在著(zhù)弊端，這就是學(xué)生的自主學(xué)習不到位，在獲得知識的過(guò)程中缺少自主探究的過(guò)程。這個(gè)問(wèn)題就是我發(fā)現的問(wèn)題和努力改進(jìn)的方面。
生物實(shí)驗報告3
實(shí)驗名稱(chēng)：
用高倍顯微鏡觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)
一、實(shí)驗目的
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀(guān)察高等植物的葉綠體在細胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強光灼傷。在強光下,葉綠體以其橢球體的側面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣�；罴毎械募毎|(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài)，觀(guān)察細胞質(zhì)的流動(dòng)，可以用細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運動(dòng)做為標志。
三、材料用具
蘚類(lèi)的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養皿，鉛筆
四、實(shí)驗過(guò)程（見(jiàn)書(shū)Ｐ30）
1．制作蘚類(lèi)葉片的臨時(shí)裝片
2．用顯微鏡觀(guān)察葉綠體
3．制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4．用顯微鏡觀(guān)察細胞質(zhì)流動(dòng)
物理實(shí)驗報告 ·化學(xué)實(shí)驗報告 ·生物實(shí)驗報告 ·實(shí)驗報告格式 ·實(shí)驗報告模板
五、討論
1．細胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng)，為什么？
2．葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系？
3．植物細胞的細胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài)，這對于活細胞完成生命活動(dòng)有什么意義？
4．用鉛筆畫(huà)一個(gè)葉片細胞，標出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
生物實(shí)驗報告4
霉菌的培養與形態(tài)學(xué)觀(guān)察：實(shí)驗一真菌培養基的配制與滅菌
實(shí)驗目的：
�。�1）了解培養基的配置原理和方法，掌握分離培養微生物的有關(guān)準備工作。
�。�2）掌握高壓滅菌方法及原理
實(shí)驗原理：
�。�1）培養基的制備原理：
培養基是供微生物生長(cháng)、繁殖、代謝的混合養料。
從營(yíng)養角度分析：
營(yíng)養：碳源、氮源、能源、生長(cháng)素、水分和無(wú)機鹽等；?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力；?一定的氧化還原電位；?合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì)，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復融化，其凝固性降低。
�。�2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內溫
度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。
實(shí)驗材料與方法
配制培養基所需器材
實(shí)驗設備：高壓蒸汽滅菌器。
實(shí)驗器材：500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養基、天平、砝碼、
稱(chēng)量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養基等集中放講臺前高壓桶內，送到洗刷室統一高壓滅菌條件及注意事項
高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養基113℃，15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養基打開(kāi)平皿包裝倒平板（10塊）注意事項：空氣環(huán)境無(wú)菌（應在酒精燈火焰周?chē)鸁o(wú)菌區）。
a.在酒精燈火焰處，傾斜打開(kāi)瓶口。
b.瓶口要過(guò)火焰。
c.左手掀開(kāi)平皿小口。
d.傾注滿(mǎn)皿底再多一點(diǎn)，約10ml（7cm直徑平皿）。
e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養過(guò)程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉平板放塑料筐內，4℃備用。
分析與討論
�。�1）如何證明培養基滅菌是否徹底?
把滅菌后的培養基按滅菌鍋內的不同位置，每處抽取數管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養一周左右進(jìn)行檢查。如果培養基沒(méi)有什么變化，說(shuō)明滅菌效果良好；如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據上述情況進(jìn)行改進(jìn)；如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌，說(shuō)明滅菌溫度或滅菌時(shí)間不夠，應提高壓力或延長(cháng)滅菌時(shí)間。經(jīng)過(guò)幾次檢驗都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
經(jīng)過(guò)幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
�。�2）為什么說(shuō)消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫學(xué)必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過(guò)不同途徑和媒介進(jìn)入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預防和控制其感染具有重要意義。自古以來(lái)，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達到預防疾病的目的。實(shí)際上，除了在臨床醫療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學(xué)實(shí)驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過(guò)程中都需要避免微生物的污染。
實(shí)驗二霉菌的接種與培養
實(shí)驗目的與要求：掌握霉菌與酵母菌的接種與培養方法。
實(shí)驗原理：
接種是微生物實(shí)驗及科學(xué)研究中一項基本操作技術(shù)。根據實(shí)驗目的和要求，
選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。
無(wú)菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進(jìn)行，所有器皿均須嚴格消毒，培養基應事先做無(wú)菌試驗，
接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養四大類(lèi)微生物時(shí)應注意選擇適宜的培養條件。多數細菌為專(zhuān)性需氧菌與兼性需氧菌，少數為厭氧菌。多數食品腐敗菌和工業(yè)用菌種，以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長(cháng)溫度為37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）條件下生長(cháng)良好。多數放線(xiàn)菌為好氧菌，少數為厭氧菌，最適生長(cháng)溫度為28～30℃，多數適宜在偏堿性環(huán)境中生長(cháng)（PH7.5～8.5）。
實(shí)驗材料與方法
�。�1）實(shí)驗材料：實(shí)驗設備：溫箱。
實(shí)驗器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無(wú)菌蓋玻片、無(wú)菌濾紙、無(wú)菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
�。�2）實(shí)驗方法：平板接種：毛霉→PDA平板（點(diǎn)植法）
啤酒酵母→PDA平板（五區分離劃線(xiàn)法）青霉、曲霉→PDA平板（連續劃線(xiàn)法）
小室載玻片培養法：
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無(wú)菌PDA瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養小室中的載玻片上，制作過(guò)程注意無(wú)菌。
3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養基四周，用無(wú)菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并(轉載于:l滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標記，置28～30℃培養3～5d
糧食產(chǎn)品的平板接種：
1.取糧食樣品20g,放入無(wú)菌燒杯，加無(wú)菌水洗滌，
反復10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內，每皿可接種5-10粒。
放線(xiàn)菌的接種：取細黃鏈霉菌劃線(xiàn)法接種，在接種的劃線(xiàn)處，無(wú)
菌操作斜插入蓋玻片數張。
注意事項：
1.空氣環(huán)境無(wú)菌（應在酒精燈火焰周?chē)鸁o(wú)菌區）
2.在酒精燈火焰處，傾斜打開(kāi)瓶口。
3.接種環(huán)使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環(huán)和金屬絲燒紅即可。
4.接種環(huán)使用后，先在火焰周?chē)循h(huán)上標本烤干，再燒灼滅菌，以免標本汽化，爆烈四濺，污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過(guò)火焰2－3次，殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類(lèi)及產(chǎn)生毒素？
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌（放線(xiàn)菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素
2、常用霉菌培養基有哪些？
馬鈴薯蔗糖培養基
豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養基察氏培養基
3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？
�。�1）連續劃線(xiàn)法（青霉、曲霉）
青霉與曲霉為局限性生長(cháng)的霉菌。應采用連續劃線(xiàn)接種法接種。（2）點(diǎn)植法（根霉、毛霉）
根霉與毛霉生長(cháng)區域比較大，應采用點(diǎn)植法。（3）小室載玻片培養法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）
實(shí)驗三霉菌的制片與形態(tài)觀(guān)察
實(shí)驗目的：學(xué)習并掌握觀(guān)察霉菌形態(tài)的.基本方法；
了解四類(lèi)常見(jiàn)霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線(xiàn)菌的基本形態(tài)特征。
實(shí)驗原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線(xiàn)菌粗得多（約為3-10μm）,常是細
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀(guān)察。霉菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍染色液，用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細胞不變形，具有殺菌、防腐作用，不易干燥，能保持較長(cháng)時(shí)間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍色能增大反差。
實(shí)驗材料：
�。ㄒ唬┚N：在馬鈴薯瓊脂平板上培養3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉（Mucorsp.）、根霉；
�。ǘ┢鞑募坝镁撸鸿囎�、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實(shí)驗方法：
�。ㄒ唬┲苯又破^(guān)察
于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀(guān)察，必要時(shí)再換高倍鏡（二）小室培養觀(guān)察
將載玻片直接放低倍鏡下觀(guān)察，再換高倍鏡觀(guān)察。
觀(guān)察原則：
毛霉：用低倍鏡觀(guān)察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀(guān)察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀(guān)察有無(wú)假根。
曲霉：在高倍鏡下觀(guān)察菌絲有無(wú)隔膜，分生孢子著(zhù)生位置，辨認分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉：在高倍鏡下觀(guān)察菌絲有無(wú)隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實(shí)驗結果：
分析與討論：
青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同？
青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長(cháng)有掃帚狀的結構，結構的每一個(gè)分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進(jìn)行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結構的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類(lèi)的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查？
生物實(shí)驗報告5
實(shí)驗名稱(chēng)：
觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
實(shí)驗目的：
1、學(xué)習制作洋蔥表皮玻片標本。
2、學(xué)會(huì )使用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮，用圖畫(huà)記錄觀(guān)察到的洋蔥表皮細胞。
3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實(shí)驗重點(diǎn)：
用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
實(shí)驗難點(diǎn)：
正確使用顯微鏡。
實(shí)驗準備：
分組實(shí)驗器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實(shí)驗過(guò)程：
一、導入課題
出示洋蔥。問(wèn)：如果從它的內表皮上揭下一塊，用顯微鏡來(lái)觀(guān)察能看到些什么呢？（板書(shū)課題）
二、制作洋蔥表皮玻片標本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。
�。�1）在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水；
�。�2）用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個(gè)“井”字，用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央，注意標本要平展開(kāi)，不能折疊；
�。�3）用蓋玻片傾斜著(zhù)蓋到標本上面，放蓋玻片時(shí)，先放一端，再慢慢放下另一端，注意不要有氣泡。如水不足，可沿蓋玻片邊緣滴加；若水分過(guò)多，可用吸水紙吸掉；
�。�4）從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒，并把玻片微微傾斜，再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水；
�。�5）洋蔥表皮玻片標本做成可進(jìn)行觀(guān)察。
2、學(xué)生以組為單位自制玻片標本（最好制三份裝片，便于下面的對比觀(guān)察），教師巡視指導（教育學(xué)生注意安全）。
三、觀(guān)察洋蔥表皮細胞
1、先用肉眼觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)在科學(xué)記錄本上。
2、再用放大鏡觀(guān)察洋蔥表皮將看到的內容畫(huà)到科學(xué)記錄本上。
3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀(guān)察到什么？它們有何不同？
4、利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
�。�1）、出示顯微鏡，引導學(xué)生認識顯微鏡，簡(jiǎn)介各部分的名稱(chēng)、功能及使用方法，學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
�。�2）、各組利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。（師操作演示：安放――對光――上片――調焦――觀(guān)察。生一步步跟著(zhù)操作。）
�。�3）、學(xué)生觀(guān)察、記錄、描畫(huà)洋蔥表皮細胞。教師巡視指導，各組的實(shí)驗組長(cháng)監督組員操作是否規范，要求每個(gè)人都要操作、都要觀(guān)察，并將觀(guān)察結果進(jìn)行交流。組長(cháng)將大家在顯微鏡下的發(fā)現畫(huà)到科學(xué)記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現。
�。�1）各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現。
�。�2）各組將所畫(huà)的觀(guān)察結果向全班展示。
�。�3）交流討論評價(jià)。
6、師小結：我們發(fā)現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細節更多，更清楚。我們發(fā)現洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規則的多邊形組成的，而且大多呈長(cháng)方形，外為細胞壁，內為無(wú)色細胞質(zhì)和細胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結構，就是洋蔥的細胞。（師一邊描述一邊畫(huà)洋蔥細胞簡(jiǎn)圖）
四、實(shí)驗結束。
回收實(shí)驗器材，整理實(shí)驗桌。
生物實(shí)驗報告6
實(shí)驗: 練 習 使 用 顯 微 鏡
目的要求:
1、練習使用顯微鏡，學(xué)會(huì )規范的操作方法。
2、能夠獨立操作顯微鏡。
3、能夠將標本移動(dòng)到視野中央，并看到清晰的圖象。
材料用具：
顯微鏡、e字玻片、動(dòng)植物永久玻片、擦鏡紙、紗布
方法和步驟:
一、對照圖示認識顯微鏡，識別顯微鏡的結構及各部分的作用。
二、練習使用顯微鏡
1、取鏡和安放
右手握住鏡臂，左手托住鏡座。 把顯微鏡放在實(shí)驗臺上，略偏左（顯微鏡放在距實(shí)驗臺邊緣7厘米左右處）。安裝好目鏡和物鏡。
2、對光
轉動(dòng)轉換器，使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。 把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開(kāi)，便于畫(huà)圖)。轉動(dòng)反光鏡，使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡，可以看到白亮的視野。
3、放置玻片標本
4、觀(guān)察 (先低后高)
把所要觀(guān)察的玻片標本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。 轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼 睛看著(zhù)物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。 左眼向目鏡內看，同時(shí)反方向轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
5、收放
注意事項
1、注意安全，不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。
2、材料對準通光孔，用壓片夾將玻片壓好。
3、下降鏡筒時(shí)，不要注視目鏡，一定要注視物鏡，以免損壞玻片標本和物鏡頭。
4、取下玻片標本時(shí)要小心;
5、實(shí)驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動(dòng)轉換器，把兩個(gè)物鏡偏到兩旁， 1
并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，送回原處。 思考回答：
1、在進(jìn)行低倍鏡觀(guān)察時(shí)，使鏡筒下降至接近玻片的過(guò)程中，眼睛應注視什么地方？為什么？
2、光線(xiàn)較暗時(shí)，應選用反光鏡的平面還是凹面？
3、怎樣計算出視眼中的圖像的放大倍數？
4、若視眼中“e”位于左上方，怎樣操作才能將其移到視眼中央？
生物實(shí)驗報告7
一、實(shí)驗目的
1. 學(xué)會(huì )提取和分離葉綠體中色素的方法。
2. 比較、觀(guān)察葉綠體中四種色素：理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系
二、實(shí)驗原理
光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑
中。故要提取色素，要破壞細胞結構，破壞葉綠體膜，使基粒片層結構直接與有機溶劑接
觸，使色素溶解在有機溶劑中。
葉綠體中的色素有四種，不同色素在層析液(脂溶性強的有機溶劑)中的溶解度不同，
因而隨層析液的擴散速度也不同。
三、材料用具
取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。
四、實(shí)驗過(guò)程（見(jiàn)書(shū)Ｐ54）
1.提取色素：
2.制備濾紙條：
3.色素分離，紙層析法。（不要讓濾液細線(xiàn)觸及層析液）
4.觀(guān)察：
層析后，取出濾紙，在通風(fēng)處吹干。觀(guān)察濾紙條上出現色素帶的數目、顏色、位置和寬窄。結果是：4條色素帶從上而下依次是：胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍綠色)、葉綠素b(黃綠色)。
五、討論
1.濾紙條上的濾液細線(xiàn)為什么不能接觸到層析液？
2．提取和分離葉綠體中色素的關(guān)鍵是什么？
生物實(shí)驗報告8
實(shí)驗一:練習使用顯微鏡
目的要求:
1.練習使用顯微鏡，學(xué)會(huì )規范的操作方法。
2.能夠獨立操作顯微鏡。
3.能夠將標本移動(dòng)到視野中央，并看到清晰的圖象。
材料用具:顯微鏡，寫(xiě)有“上”字的玻片，動(dòng)、植物玻片標本，擦鏡紙，紗布。
方法步驟
1.右手握住鏡臂，左手托住鏡座。
2．把顯微鏡放在實(shí)驗臺距邊緣7厘米左右處，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
3．動(dòng)轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。
4．把一個(gè)較大的光圈對準通光孔。一只眼注視目鏡內，另一只眼睜開(kāi)。轉動(dòng)反光鏡，使光線(xiàn)通過(guò)通光孔反射到鏡筒內。通過(guò)目鏡可以看到白亮的圓形視野。
5.把所要觀(guān)察的玻片標本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。
6．轉動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止此時(shí)眼睛一定要看著(zhù)物鏡）。
7．一只眼向目鏡內看，同時(shí)逆時(shí)針?lè )较蜣D動(dòng)粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉動(dòng)細準焦螺旋，使看到的物象更加清晰。
8．練習將所觀(guān)察的標本移到視野中央，先移動(dòng)一下標本，物象朝相反的方向移動(dòng)。說(shuō)明了在目鏡中看到的像是真實(shí)的像的倒像。
注意事項
實(shí)驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。如需擦拭目鏡和物鏡，請用擦鏡紙。轉動(dòng)轉換器，把兩個(gè)物鏡偏到兩旁，并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里，送回原處。
討 論
1.顯微鏡的使用步驟有哪些？
答：1、取鏡和安放2、對光3、觀(guān)察（放片、調焦） 4、清潔與收鏡
2.使用顯微鏡觀(guān)察時(shí)，為什么在下降鏡筒時(shí)眼睛要注視物鏡？
答：物鏡把載玻片壓碎，也容易劃傷物鏡。
3.在顯微鏡下能看清寫(xiě)在不透明紙上的“上”字嗎？
答：看不到，不透明的紙會(huì )阻擋光線(xiàn)從物鏡進(jìn)入光筒再從目鏡射出，所以可能什么也看不見(jiàn)。
實(shí)驗時(shí)間：20xx.9.15
實(shí)驗二:觀(guān)察植物細胞
實(shí)驗目的：
1、制作植物細胞的臨時(shí)裝片,學(xué)習制作臨時(shí)裝片的基本辦法.
2、認識植物細胞等基本結構. 3、練習畫(huà)細胞結構圖.
實(shí)驗準備：
分組實(shí)驗器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。
實(shí)驗過(guò)程：
一、制作洋蔥表皮玻片標本
1、用潔凈地紗布把載玻片擦拭干凈。
2、把載玻片放在實(shí)驗臺上，用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。
制作臨時(shí)裝片
3、用鑷子從洋蔥鱗片葉內側撕取一小塊透明在膜——內表皮。把撕下的內表皮浸入載玻片的水滴中，用鑷子把它展平。
4、用鑷子夾起蓋玻片，是它的一邊先解除4載玻片上的水滴，然后緩緩地放下，蓋在要觀(guān)察的材料上，這樣才能避免蓋玻片下面出現氣泡而影響觀(guān)察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側。
6、用吸水紙從蓋玻片的另一側吸引，使染液浸潤標本的全部。
三、觀(guān)察洋蔥表皮細胞
利用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞，先用低倍鏡下觀(guān)察，再在高倍鏡下觀(guān)察。
四、洋蔥鱗片葉表皮細胞圖。
五、實(shí)驗結束。
回收實(shí)驗器材，整理實(shí)驗桌。
實(shí)驗時(shí)間： 20xx.9.22
實(shí)驗三：觀(guān)察人體口腔上皮細胞
目的要求：
1. 制作和觀(guān)察人體口腔上皮細胞的臨時(shí)裝片
2. 認識人體口腔上皮細胞的結構
3. 熟練畫(huà)細胞結構圖
材料用具：
顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽 方法步驟
(一) 制作人口腔上皮細胞的臨時(shí)裝片
1. 用紗布擦凈載玻片、蓋玻片（很薄，應輕擦）
2. 在載玻片中央滴一滴生理鹽水（0.9%），說(shuō)明：為什么用0.9%的生理鹽水，觀(guān)
察洋蔥表皮裝片用清水，都是為了讓細胞所處的環(huán)境和它們所生活的環(huán)境相同，
不至于脹破或變形，使細胞保持原狀。
3. 漱凈口。目的：將口腔的飯粒清除，以保證所取的細胞純度。
4. 用牙簽在口腔內壁輕劃幾下，將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中，盡量涂均勻。
5. 蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片，使它的一側先接觸載玻片的水滴，然后慢慢放
平（注意：避免產(chǎn)生氣泡）。
6. 染色。①在蓋玻片一側滴加稀碘液，②用吸水紙在蓋玻片另一側吸引，使染液
浸潤標本的全部。
(二) 用顯微鏡觀(guān)察。
使用顯微鏡①安放②對光③放置玻片標本，調節焦距，用眼觀(guān)察，在視野中會(huì )看到被染成桔黃色的上皮細胞.
�。ㄈ├L圖：
人體口腔上皮細胞模式圖
�。ㄋ模┱恚呵鍧嵅Ｆ�，廢物放在指定位置。
歸納討論：人的口腔上皮細胞有哪些基本結構，植物細胞和動(dòng)物細胞相同和不同之處。 答：人的口腔上皮細胞的基本結構有細胞膜、細胞質(zhì)和細胞核；植物細胞與動(dòng)物細胞相比，細胞壁、葉綠體和液泡是植物細胞特有的。
實(shí)驗時(shí)間： 20xx.9.27
實(shí)驗四：觀(guān)察人體的基本組織
目的要求：
1．觀(guān)察人體基本組織的永久切片，認識人體的四種基本組織；
2．描述同一種組織中細胞的共同特點(diǎn)；
3．描述不同組織中細胞形態(tài)上的不同之處；
4．根據觀(guān)察，概述組織的共同特點(diǎn)，形成組織的概念。
材料器具：
顯微鏡；扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片；橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片；骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結締組織玻片；神經(jīng)組織的玻片。
方法步驟：
1．根據教師提供的玻片，逐個(gè)在顯微鏡低倍鏡下認真觀(guān)察，注意細胞的形態(tài)特征和細胞間的聯(lián)系特點(diǎn)。
2．根據觀(guān)察，同組間的同學(xué)互相討論，認真填寫(xiě)下表。
主要分布位組織類(lèi)型 主要特征 功能 舉例 置
皮膚，消化 皮膚，小腸腺上皮組織 排列緊密形成表面 保護，分泌 道 上皮
四肢，軀 骨骼肌，平滑肌肉組織 呈長(cháng)條狀緊密排列 干，內臟器 收縮，舒張 肌 官
支持，連接， 軟骨，軟組結締組織 細胞之間間隙較大 全身各處 保護，營(yíng)養 織，血液
產(chǎn)生傳導興神經(jīng)組織 形狀獨特呈發(fā)散狀 神經(jīng)系統 神經(jīng)纖維 奮
實(shí)驗時(shí)間：20xx.10.26
實(shí)驗五：觀(guān)察葉片結構
目的要求:
1,練習徒手切片.
2認識葉片的結構.
3畫(huà)葉片的表皮細胞和保衛細胞圖.
材料用具:
新鮮葉片,顯微鏡,雙面刀片,鑷子,載玻片,蓋玻片,葉片的永久切片,盛有清水的培養皿,滴管,吸水紙,碘液,紗布,毛筆,小木板.
方法步驟:
一,練習徒手切片,制作葉片橫切片的臨時(shí)切片
1,把新鮮的葉片平放在小木板上.
2,右手捏緊并排的兩片刀片,沿著(zhù)圖中虛線(xiàn)的方向,迅速切割.
3,刀片的夾縫中春游切下的薄片.要多切幾次(每且一次，刀片要咱蘸一下稅）。把切下的薄片放入水中。
4，用毛筆蘸出最薄的一片，制成臨時(shí)切片。
二，觀(guān)察葉片的結構
1用顯微鏡先觀(guān)察葉片橫切面的臨時(shí)切片，再觀(guān)察葉片的永久橫切片。
2在顯微鏡下分清業(yè)的表皮，葉肉和葉脈。
三，觀(guān)察葉片的下表皮
1用鑷子撕下一小塊葉片（如蠶豆葉片的下表皮，制成臨時(shí)裝片。
2 用顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察，看一看葉片下表皮的細胞是什么樣子的，下表皮上有沒(méi)有氣孔？下表皮氣孔多于上表皮。
四，實(shí)驗結果。
討論：保衛細胞和它周?chē)募毎诮Y構上有什么不同？保衛細胞的這種結構特點(diǎn)對蒸騰作用有什么意義？
答：當水分充足時(shí),保衛細胞膨脹張開(kāi),則氣孔張開(kāi),這時(shí),蒸騰作用很強；當水分不充足時(shí),保衛細胞收縮關(guān)閉,則氣孔關(guān)閉,這時(shí),蒸騰作用變弱。保衛細胞能夠控制氣孔開(kāi)關(guān),所以也就能起到促進(jìn)或減緩蒸騰作用的意義。
實(shí)驗時(shí)間：20xx.12.5
生物實(shí)驗報告9
實(shí)驗生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定
一、實(shí)驗目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗原理
1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類(lèi)較多，常見(jiàn)的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基)，因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒(méi)有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實(shí)驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過(guò)程為：淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí)，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中，雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡(luò )合物，這個(gè)反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應。
3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P18)
四、實(shí)驗用品(見(jiàn)書(shū)P18)
五、注意
1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗，在加熱試管中的溶液時(shí)，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開(kāi)水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時(shí)試管口不要朝向實(shí)驗者，以免試管內溶液沸騰時(shí)沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過(guò)于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開(kāi)大燒杯中的開(kāi)水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A，再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據是什么？
生物實(shí)驗報告10
一、實(shí)驗目的
1. 初步學(xué)會(huì )觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗原理
當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中，使細胞壁和原生質(zhì)層都出現一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時(shí)，原生質(zhì)層就會(huì )與細胞壁逐漸分離開(kāi)，也就是分升了質(zhì)壁分離當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí)，外界溶液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入細胞液中，整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì )慢慢地恢復成原來(lái)的狀態(tài)，使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P60)
物理實(shí)驗報告 ——化學(xué)實(shí)驗報告 ——生物實(shí)驗報告 ——實(shí)驗報告格式 ——實(shí)驗報告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會(huì )出現什么現象?
2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時(shí)，紅細胞會(huì )不會(huì )發(fā)生質(zhì)壁分離現象?為什么?
3.畫(huà)一個(gè)細胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過(guò)0.3g/ml蔗糖溶液處理，再經(jīng)過(guò)清水處理的細胞變化的一系列模式圖。
生物實(shí)驗報告11
質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測
姓名：XXX學(xué)號：2011001400XX年級：20xx級生物基地班 實(shí)驗日期：20xx年9月16日—30日組別：6組 同組者：XX
一、【實(shí)驗目的】
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學(xué)習并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗原理。
3、學(xué)習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實(shí)驗原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒（Plasmid）是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子，分布于細菌、放線(xiàn)菌、真菌以及一些動(dòng)植物細胞中，但在細菌細胞中含量最多。細菌質(zhì)粒大小介于1～200Kb之間，是應用最多的質(zhì)粒類(lèi)群，在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個(gè)步驟：①培養細菌，使質(zhì)粒DNA大量擴增；②收集和裂解細菌；③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括：堿裂解法：0。2molNaOH+1%SDS；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；SDS裂解法：10%SDS，一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據宿主菌株類(lèi)型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結構等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中，染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來(lái)，但是兩者變性與復性所依賴(lài)的溶pH值不同。在pH值高達12。0的堿性溶液中，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開(kāi)而變性；共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學(xué)上是相互纏繞的。當用pH值4。6的KAc（NaAc）高鹽溶液調節堿性溶液至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA可恢復原來(lái)的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結構而溶解于溶液中；但染色體DNA不能復性，而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復合物等一起形成纏連的、可見(jiàn)的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過(guò)離心，與復性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA，可用無(wú)水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類(lèi)似，乙醇沉淀
DNA的同時(shí)，也伴隨著(zhù)RNA沉淀，可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通過(guò)酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
電泳（electrophoresis）是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著(zhù)與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現象。各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場(chǎng)中會(huì )向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì)，它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中，其中的電離子會(huì )發(fā)生移動(dòng)，移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異，就可以區別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段，是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接觀(guān)察到，甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話(huà)，這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實(shí)驗。
分子生物學(xué)中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高，長(cháng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進(jìn)行電泳，并能容納較大的DNA上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(cháng)鏈狀多聚物，由β—D—吡喃半乳糖與3，6—脫水—L—吡喃半乳糖組成，相對分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬(wàn)bp），小片段DNA（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定DNA的相對分子質(zhì)量，分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段，進(jìn)一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負電荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素：樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。
三、【實(shí)驗材料】
1、實(shí)驗儀器
培養皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（Eppendorf管）、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。
2、實(shí)驗試劑
LB培養基，抗生素Ap（氨芐青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（PCI）混合液，預冷無(wú)水乙醇，TAE電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（EB），DNA相對分子質(zhì)量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實(shí)驗步驟】
1、準備實(shí)驗
配制LB液體培養基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配LB固體培養基；準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個(gè) ，將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。
2、菌體培養
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落，接種于20mlLB液體培養基中進(jìn)行37℃振蕩過(guò)夜培養，培養基中加Ap100ul
�。�100ug/ml），質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因，使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長(cháng)。 過(guò)夜培養后菌體量大，雜質(zhì)較多，然后用移液槍吸取過(guò)夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中，培養基中加入Ap250ul，37℃振蕩培養4—6h至對數生長(cháng)期后期，生長(cháng)速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質(zhì)少，適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
�。�1）稱(chēng)量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒滿(mǎn)，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細胞。
�。�2）向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱(chēng)重得14。437g，則菌體質(zhì)量為106mg。
�。�3）洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液Ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會(huì )快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細胞提前破裂，防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生長(cháng)。Tris—Cl溶液提供適當的pH。
�。�4） 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml（與溶液Ⅰ對應），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發(fā)生了從bilayer（雙層膜）結構向micelle（微囊）結構的相變化導致細胞溶解。同時(shí)，強堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性；SDS為下一步沉淀做鋪墊。
�。�5）按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1。5ml（與溶液Ⅰ、Ⅱ對應），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因為長(cháng)時(shí)間的堿性條件會(huì )打斷基因組DNA，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被PDS共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒DNA復性。反應形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
�。�6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側，用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻，加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會(huì )起任何化學(xué)反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩定存在，當加入乙醇時(shí)，乙醇會(huì )奪去DNA周?chē)乃肿�，使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
�。�7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。
�。�8）以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色，隨著(zhù)水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o(wú)色。所以為了完全溶解質(zhì)粒，要在離心管上標記質(zhì)粒所在位置。
�。�9）將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉移到一個(gè)Eppendorf管中。TE是pH緩沖液，為DNA提供穩定的生理狀態(tài)，呈弱堿性，有利于保護堿基對。同時(shí)含有EDTA是二價(jià)陽(yáng)離子的螯合劑，抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
�。�1）Eppendorf管中加入RNase A（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h
�。�2）將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）Tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的，顯黃色。苯
酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無(wú)色，在中間產(chǎn)生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質(zhì)。
�。�3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑，但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì )影響DNA的酶切，它本身易被氧化，會(huì )損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質(zhì)粒中的脂類(lèi)，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過(guò)程中出現的泡沫，有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質(zhì)的存在。
�。�4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中，得上清液400ul。
�。�5）向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻，再加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。
�。�6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到DNA沉淀，為白色。
�。�7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
�。�8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測
�。�1）稱(chēng)取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標好液面位置，加入40ml的1×TAE電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補充在溶膠過(guò)程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。
�。�2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液，至液面覆蓋過(guò)膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。
�。�3）電泳1h，觀(guān)察溴酚蘭的帶（藍色）的移動(dòng)。
�。�4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色，完全浸泡約5min。
�。�5）凝膠成像儀觀(guān)察。
五、【注意事項】
�。�1）滴加溶液II時(shí)，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動(dòng)作要快，因為強堿在溶液中停留時(shí)間不能過(guò)長(cháng)，否則會(huì )破壞質(zhì)粒DNA。
�。�2）加入溶液III后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液III中和強堿使質(zhì)粒復性，不可劇烈震蕩， 防止染色體DNA斷裂，應該上下顛倒離心管，使其混勻。
生物實(shí)驗報告12
一、實(shí)驗名稱(chēng)：
用顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞
二、實(shí)驗材料：
顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片，及其他細胞裝片。
三、實(shí)驗步驟：
1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著(zhù)光放在實(shí)驗臺上。
2、對光：轉動(dòng)轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。
3、調節載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見(jiàn)亮的光圈。
4、觀(guān)察：調節粗準焦螺旋，把所要觀(guān)察的洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內看，同時(shí)轉動(dòng)粗準焦螺旋等，直到看清切片上的細胞為止，最后整理器材。
四、使用注意事項：
1、取送顯微鏡時(shí)，應右手握住鏡臂,左手托住鏡座，輕拿輕放。
2、鏡檢時(shí)，坐姿端正，一般用左眼觀(guān)察物象，用右眼看著(zhù)實(shí)驗報告紙畫(huà)圖。兩眼須同時(shí)睜開(kāi)。
3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀(guān)察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調節焦距時(shí)，切勿使用粗調節器，以免壓壞標本，損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開(kāi)鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。
五、實(shí)驗原理：
利用教學(xué)顯微鏡觀(guān)察洋蔥表皮細胞。
六、創(chuàng )新點(diǎn)：
在實(shí)驗過(guò)程中為學(xué)生提供多種細胞裝片，以供學(xué)生操作、觀(guān)察，增加了學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗的時(shí)間，使學(xué)生在實(shí)驗中經(jīng)歷調節顯微鏡的焦距的過(guò)程，從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。
生物實(shí)驗報告13
一、實(shí)驗目的：
1、通過(guò)對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學(xué)顯微鏡觀(guān)察，了解細胞的形態(tài)及其顯微結構；
2、學(xué)習顯微測量的方法，對細胞的大小有一直觀(guān)認識。
二、實(shí)驗材料和儀器：
小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；
普通光學(xué)顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。
三、實(shí)驗步驟：
(一)細胞形態(tài)觀(guān)察
l、動(dòng)物細胞的觀(guān)察
�。�1）人肝細胞切片：在顯微鏡下仔細觀(guān)察肝細胞的形態(tài)構造。
�。�2）雞血細胞涂片的觀(guān)察：觀(guān)察血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細胞的觀(guān)察
取蠶豆葉片橫切片的觀(guān)察：注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。
�。ǘ┘毎拇笮『蜏y量
1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺測微尺和轉動(dòng)目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調焦)，使兩尺左邊的一直線(xiàn)重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線(xiàn)。
4、記錄兩條重合線(xiàn)間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的格數
四、實(shí)驗結果：
1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量：
五、作業(yè)與思考：
1、血細胞按含量高低，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。
白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運送氧。 白細胞：主要扮演了免疫的角色，當病菌侵入人體時(shí)，白細胞能穿過(guò)毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過(guò)程中起著(zhù)重要作用。細胞形態(tài)見(jiàn)下圖。
2、植物細胞一般比動(dòng)物細胞大一些。形態(tài)圖見(jiàn)下。
3、在不同放大倍數下，測定的細胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數越大，在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大，而更容易測量準確。
生物實(shí)驗報告14
一、實(shí)驗目的：
1、掌握顯示細胞中過(guò)氧化物酶反應的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細胞的形態(tài)學(xué)檢測方法
二、實(shí)驗原理：
1、細胞內的過(guò)氧化物酶能把許多胺類(lèi)氧化為有色化合物，用聯(lián)苯胺處理標本，細胞內的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍，進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物，因而可以根據顏色反應來(lái)判定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍色聯(lián)苯胺是不穩定的，無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過(guò)程。
3、凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀(guān)察是檢測細胞凋亡的一種直觀(guān)、可靠的方法。
三、實(shí)驗步驟：
細胞中過(guò)氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；
2、取骨髓細胞：用斷頸法處死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開(kāi)股骨一端，用牙簽尖的一端插入剪開(kāi)的小孔中，摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上；
3、涂片：用另一玻片將骨髓細胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi)，室溫晾干；
4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿(mǎn)涂片為宜，處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應6分鐘（以蓋滿(mǎn)涂片為宜）6、清水沖洗，番紅復染2min。
7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀(guān)察，后換高倍鏡下觀(guān)察（油鏡100×）
細胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀(guān)察吉姆薩染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。吖啶橙染色:
1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀(guān)察。
四、結果與分析：
1、根據隨機選擇的幾個(gè)視野的統計，該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化（吖啶橙染色）
五、思考題：
1、細胞凋亡的調控機制
細胞凋亡是一個(gè)受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動(dòng)自殺過(guò)程，其觸發(fā)因素多種多樣，包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。
2、細胞凋亡的特征
凋亡細胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細胞質(zhì)濃縮;細胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周?chē)?邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細胞凋亡的方法
定性的研究方法：常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀(guān)察（普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）
定量或半定量的研究方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實(shí)驗報告15
第十次實(shí)驗分離產(chǎn)淀粉酶微生物
學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院
專(zhuān)業(yè)：生物科學(xué)類(lèi)
年級：20xx級
姓名：
學(xué)號：1007040085
20xx年XX月XX日
實(shí)驗十分離產(chǎn)淀粉酶的微生物
一、實(shí)驗目的
1、熟悉常用微生物培養基（牛肉膏蛋白胨培養基）的配制方法。
2、學(xué)習各種無(wú)菌操作技術(shù)，并用此技術(shù)進(jìn)行為微生物稀釋分離、劃線(xiàn)分離接種。
3、用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板發(fā)分離微生物。
4、認識為微生物存在的普遍性，體會(huì )無(wú)菌操作的重要性。
5、掌握分離產(chǎn)淀粉酶微生物的試驗方法和步驟，了解產(chǎn)淀粉酶的微生物種類(lèi)及形態(tài)。
二、實(shí)驗原理
土壤是微生物生活的大本營(yíng)，是尋找和發(fā)現有重要應用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類(lèi)微生物數量不同，一般土壤中細菌數量最多，其次為放線(xiàn)菌和霉菌。一般在較干燥，偏堿性、有機質(zhì)豐富的土壤中放線(xiàn)苗數量較多；酵母菌在一般土壤中的數量較少，而在水果表皮、葡萄園、果園土中數量多些。本次實(shí)驗從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的微生物，應該取那些富含產(chǎn)淀粉酶的微生物的土樣。從復雜的微生物群體中獲得只含有一種或某一類(lèi)型微生物的過(guò)程稱(chēng)為微生物的分離與純化。常用的方法有
1、簡(jiǎn)單單細胞挑取法
2、平板分離法和稀釋涂布平板法
此次實(shí)驗采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結合，該方法操作簡(jiǎn)單，普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括：
1)稀釋后的細胞懸液圖不在平板上可以分離得單個(gè)菌株
2)在適合于待分離微生物的生長(cháng)條件（如營(yíng)養、酸堿度、溫度與氧等）下培養微生物，或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長(cháng)，而抑制其他微生物生長(cháng)的環(huán)境，從而淘汰一些不需要的微生物。
3)微生物在固體培養基上生長(cháng)形成的單個(gè)菌落可以是由一個(gè)細胞繁殖而成的集合體。因此可通過(guò)挑取單菌落而獲得純培養。獲得單菌落的方法可通過(guò)稀釋涂布平板或平板劃線(xiàn)等方法完成。
以淀粉作為惟一碳源的培養基培養未分離細菌，能產(chǎn)淀粉酶的細菌能生長(cháng)，且菌落周?chē)霈F透明圈（淀粉不透明，被消化后變透明），則產(chǎn)淀粉酶微生物被分離出來(lái)。本實(shí)驗采用透明圈檢驗法檢測培養物中是否有產(chǎn)淀粉酶微生物的生長(cháng)。
三、實(shí)驗儀器及試劑
1、器材：
培養皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、、天平、濾紙、pH試紙等。
2、試劑：
配制牛肉膏蛋白胨培養基的原料（牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨）、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無(wú)菌水加20粒玻璃珠，作稀釋用等。
3、土樣：
取自貴州大學(xué)農生樓后土壤10g，地下10cm左右。
四、實(shí)驗步驟：
1、配制牛肉膏蛋白胨培養基：
1）配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基400ml（用于11個(gè)平皿和7支試管斜面）牛肉膏0.5%…………………………………2g
蛋白胨1%……………………………………4g
NaCl0.5%…………………………………..2g
瓊脂2%……………………………………..8g
淀粉0.5%........................................2g
pH……………………………………7.0~7.2
�。�2）無(wú)菌水的制備
分別取9ml蒸餾水加入5支試管中，加塞后用報紙包扎捆綁，放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中，同樣的操作，滅菌備用。
�。�3）器皿的準備
將刻度吸管用報紙包扎，培養皿裝入專(zhuān)用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。
2）倒11個(gè)平板和7支試管斜面，包扎，0.1Mp、121℃、滅菌30min.
2、制備土壤稀釋液：
稱(chēng)取土樣10g，放入盛有250ml無(wú)菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中，振蕩搖勻10min使土和水充分混合，然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml（此操作要求無(wú)菌操作），加入另一盛有9ml無(wú)菌水的試管中，混合均勻，以此類(lèi)推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。
3、涂布培養：
0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養的對象，將其分別涂布在3個(gè)牛肉膏蛋白胨培養基中，共6個(gè)培養基，標號，37°C溫箱培養48h。
4、選取目的菌株：
兩天后對土壤溶液的微生物培養基進(jìn)行觀(guān)察，并取兩個(gè)菌落形態(tài)完全一致的分散的單個(gè)菌落，對其中一個(gè)噴灑盧戈氏碘液，觀(guān)察其菌落周?chē)欠癯霈F透明圈，如果出現透明圈說(shuō)明此菌株產(chǎn)淀粉酶，是目的菌株，記錄細菌明顯的性狀。
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