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微生物實(shí)習報告

時(shí)間:2022-06-24 13:24:34 實(shí)習報告 我要投稿

微生物實(shí)習報告

  在我們平凡的日常里,報告使用的次數愈發(fā)增長(cháng),報告包含標題、正文、結尾等。一聽(tīng)到寫(xiě)報告就拖延癥懶癌齊復發(fā)?以下是小編整理的微生物實(shí)習報告,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。

微生物實(shí)習報告

  一、實(shí)習時(shí)間:

  20xx.6.7-6.12

  二、實(shí)習地點(diǎn):

  食品發(fā)酵實(shí)驗室(化學(xué)樓119、123)、食品學(xué)院實(shí)習基地

  三、實(shí)習目的:

  1、學(xué)習自制酸奶的方法,熟悉從酸奶中分離和純化乳酸菌的一般方法。

  2、掌握各類(lèi)酸奶生產(chǎn)的基本工藝和要求。

  3、學(xué)習奶酒的發(fā)酵過(guò)程、工藝流程,及其注意事項。

  4、對自己所學(xué)的科學(xué)知識進(jìn)一步深化,提高實(shí)踐能力,整體策劃部署能力,動(dòng)手能力,組織能力,團體協(xié)作能力,創(chuàng )新能力等方面也有一些提高。

  四、實(shí)習內容:

  1.酵母菌篩選方案的確定

  為了獲得最佳酵母菌發(fā)酵結果,我們通過(guò)對Internet資源以及圖書(shū)資料的搜索和查尋,查的產(chǎn)酯酵母廣泛應用于白酒、黃酒、普通酒、醋、醬油中,另外,還應用于果汁中。

  所以我們準備了三種菌種來(lái)源材料:果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。第一種方法是利用果皮做來(lái)源,將削下的果皮放入帶玻璃珠的三角瓶充分振搖,梯度稀釋?zhuān)坎加赮PD瓊脂培養基上。第二種方法是用各種酒曲做為菌種來(lái)源,將酒曲粉碎,稱(chēng)量,梯度稀釋?zhuān)笸坎加赮PD瓊脂培養基上。第三種方法是利用保藏的酵母斜面作為菌種來(lái)源,用接種環(huán)在酵母斜面上取一環(huán)菌,而后用劃線(xiàn)法接種于YPD瓊脂平板上,帶用于實(shí)驗。

  經(jīng)過(guò)大家的`討論后,一致決定利用酵母斜面上的菌種,對其進(jìn)行培養。因為利用酵母斜面上的菌種在此次實(shí)習中可以用到我們實(shí)驗上所學(xué)習的知識,真正將知識用于實(shí)踐,并在實(shí)踐中得到鞏固。但是,酵母斜面上的酵母菌制得的菌懸液濃度很大,所以在菌種篩選方面,我們將菌懸液10進(jìn)制稀釋到10-5,10-6,10-7的數量級,各濃度涂布兩個(gè)平板,另六個(gè)平板用于劃線(xiàn)分離法進(jìn)行菌種分離,30度培養24到48h,觀(guān)察平板上的菌落生長(cháng)情況。初選出酵母菌,將菌落照片后就進(jìn)行顯微鏡觀(guān)察,篩選到典型的酵母菌株,進(jìn)行生化實(shí)驗。將平板上的酵母單菌落接種保藏于斜面培養基(PDA),30度培養48h后,4度冷藏。將PDA斜面培養基上保存的酵母菌接種于培養液中培養,而后接種于豆芽汁發(fā)酵液中,進(jìn)行發(fā)酵測產(chǎn)脂能力。

  2.酵母菌的篩選及鑒定

  11月25日我們按照討論決定的方案進(jìn)行了酵母菌的篩選實(shí)驗,實(shí)驗內容如下:

  2.1培養基的制備、分裝、滅菌(分述在下文中)

  在實(shí)習中共需要準備六種培養基:YPD培養基、PDA培養基、豆芽汁培養基、葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣培養基、硝酸鹽生化實(shí)驗培養基、糖發(fā)酵實(shí)驗培養基。各培養基配方如下:

  1、YPD培養基:1%酵母膏,2%蛋白胨,2%葡萄糖,2%瓊脂。

  2、PDA培養基:2%馬鈴薯,2%葡萄糖,22%瓊脂。

  秤取切成小塊的馬鈴薯,加水煮爛(20-30min),八層紗布過(guò)濾,濾液中加入葡萄糖,最后加入瓊脂。

  3、豆芽汁培養基:10%黃豆芽,2%葡萄糖,2%瓊脂

  洗凈豆芽,加水煮沸30min.用紗布過(guò)濾。濾液加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補水至設定值。

  4、糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣培養基:營(yíng)養物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化

  鈉,0.2%磷酸氫鈉,0.2%溴麝香草酚藍)配方為20g/1000ml,蒸餾水配制,pH7.4。分裝后加葡萄糖0.5%。

  5、硝酸鹽生化實(shí)驗培養基:0.3%牛肉浸膏,0.5%-1%蛋白胨,pH7.0(100ml培養基加入1g硝酸鉀)

  6、糖發(fā)酵實(shí)驗培養基:營(yíng)養物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化鈉,0.2%磷酸氫鈉,0.2%溴麝香草酚藍)配方為20g/1000ml,蒸餾水配制,pH7.4。分裝后加乳糖0.5%。

  制備:由于第6種培養基同第4種培養基,則一組配制即可,再加上無(wú)菌水,共需制備六種,則將全班分成六個(gè)組,我們?yōu)榈?組,故配制過(guò)程如下:

 。1)天平調平。

 。2)準確秤取7.8g營(yíng)養物(配390ml),葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

 。3)將營(yíng)養物放入搪瓷缸中,加入390ml蒸餾水,玻璃棒攪拌將其溶解。

 。4)pH試紙測其pH是否為7.4,若不是,用氫氧化鈉溶液調到7.4。分裝:

 。1)取三個(gè)250ml錐形瓶,每個(gè)錐形瓶中倒入130ml的上述溶液。

 。2)將上述稱(chēng)好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分別倒入三個(gè)錐形瓶中,搖晃錐形瓶使其溶解。

 。3)將加入糖的營(yíng)養液分別裝入12個(gè)試管中,每個(gè)試管用移液管放入10ml。

 。4)將每?jì)蓚(gè)葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮紙扎成一捆,即每6個(gè)試管扎成一捆,寫(xiě)上班級、組別后待滅菌。

  滅菌:將已經(jīng)包扎好的試管放入滅菌箱中,進(jìn)行滅菌待用。

  以上就是我們組的制備過(guò)程,在這個(gè)過(guò)程中應該注意以下幾點(diǎn):

  1、稱(chēng)量前天平要調平。

  2、秤取營(yíng)養物時(shí)應準確秤取。

  3、溶解后注意調pH值到7.4

  4、量取培養液時(shí)要準確,特別是向試管中分裝時(shí)要用移液管。

  2.2酵母菌的分離(詳述分離方法,培養條件及觀(guān)察到的菌落結果)

步驟過(guò)程:

  1、倒平板:待YPD培養基冷卻至50度左右后,按無(wú)菌操作法倒12只平板(每皿約倒15ml),平置,待凝。

  2、酵母菌稀釋?zhuān)喝?mL菌懸液放入裝有99ml的無(wú)菌水錐形瓶中,搖勻后再從錐形瓶中取1mL放入1號管,依次進(jìn)行,則管里酵母的濃度依次是10-2~10-7。

  3、平板分離:依次從10-7,10-6,10-5的管里取稀釋液進(jìn)行涂布平板,YPD平板每個(gè)濃度涂?jì)蓚(gè)。

  4、劃線(xiàn)法分離:用接種環(huán)從酵母斜面上取一環(huán)酵母,在酒精燈前按無(wú)菌操作法進(jìn)行劃線(xiàn),將酵母接種于6個(gè)平板中。

  5、恒溫培養:將12個(gè)培養皿平板置于30℃恒溫箱中培養24~48小時(shí)。結果:

  觀(guān)察菌落:出現了4種不同形態(tài)的菌落。

 、賵A形,菌落大,表面光滑,濕潤,突起,乳白色。

 、趫A形,菌落略小,濕潤,突起,質(zhì)地均勻,呈乳白色。

 、蹤E圓形,菌落略小,濕潤,突起,顏色均一,呈乳白色。

 、軝E圓形,菌落大,濕潤,突起,顏色均一,呈乳白色。

  結果分析:

  通過(guò)網(wǎng)上查閱資料顯示,正常條件下大多數酵母菌的菌落特征與細菌相似,但比細菌菌落大而厚,菌落表面光滑、濕潤、粘稠,容易挑起,菌落質(zhì)地均勻,正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一,菌落多為乳白色,少數為紅色,個(gè)別為黑色。啤酒酵母的菌落紅酵母的菌落各種酵母菌的菌落。

  將我們觀(guān)察的結果與資料相比,確實(shí)符合大多數酵母菌的菌落形態(tài)。結論:觀(guān)察到的是酵母菌落。

  2.3酵母菌的初步鑒定(包括革蘭氏染色和糖代謝實(shí)驗)

  2.3.1將平板上分離到的各菌株進(jìn)行簡(jiǎn)單染色后進(jìn)行鏡檢

  觀(guān)察結果為:

  球菌,各個(gè)細胞的形狀比較規整。

  結論:

  通過(guò)菌體個(gè)體形態(tài)和菌落形態(tài),初步確定出了一株酵母菌。

  注意事項:

  1、搬動(dòng)顯微鏡時(shí)應一手握住鏡臂,另一手托住底座,鏡身保持直立,并緊靠身體,步態(tài)穩健。切記單手拎提,以免目鏡頭從鏡筒上掉出而砸壞。

  2、各個(gè)鏡面切忌用手涂抹,以免手上的油、汗污染鏡面,造成發(fā)霉、腐蝕。

  2.3.2將初步確定的菌株進(jìn)行生化實(shí)驗

  步驟過(guò)程:

  用接種環(huán)從平板上挑取已分離的同一菌落接種于糖發(fā)酵管和硝酸鹽生化管中,接種完后30℃培養。24小時(shí)后觀(guān)察結果。

  與此同時(shí),將平板上的酵母單菌落接種保藏于斜面培養基(PDA),30度培養48小時(shí)后,4度冷藏,待檢其他特性。

  結果:

  驗中并沒(méi)有觀(guān)察到,但硝酸鹽管中變黃,則分析結果,可能是酵母菌生長(cháng)不旺盛,導致即使產(chǎn)氣也看不出來(lái)。

  根據這一現象,能夠說(shuō)明該菌株具有產(chǎn)酸產(chǎn)氣性能,確定此菌株確實(shí)是酵母菌。

  3、發(fā)酵產(chǎn)酯實(shí)驗(11.23-11.24)

  步驟過(guò)程:

 。1)準確吸取25ml發(fā)酵液于250ml錐形瓶中,加入25ml蒸餾水,滴2滴酚酞指示劑,用0.1mol/L的氫氧化鈉滴至微紅色,記下消耗氫氧化鈉溶液的體積。

 。2)將滴定后的發(fā)酵液轉移至250ml錐形瓶中,準確加入15ml上述氫氧化鈉標液,接上冷凝管,加熱至沸回流30min。

 。3)取下冷卻至室溫,完全轉移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的鹽酸溶液滴定至微紅色剛好消失,紀錄鹽酸溶液的用量,記錄總酯的含量。結果:

  氫氧化鈉消耗體積:V1=1.9ml

  鹽酸消耗體積:V2>15ml

  分析與結論:氫氧化鈉消耗體積1.9ml用來(lái)預估總酯含量,且其越大則總酯越少。由此可見(jiàn),產(chǎn)酯量應該不少。

  按公式:總酯=(15-V2)X0.1X10-3mol但是我們滴到18ml仍不見(jiàn)結果,并且沒(méi)有要到微紅的跡象?赡苁怯捎谂渲茖(shí)驗試劑時(shí)出現問(wèn)題,導致沒(méi)有測出總酯量。

  五、總結

  短短一周的微生物實(shí)習在緊張又有效率的節奏下順利的結束了。這是我們自己在老師協(xié)助下并親自動(dòng)手連續完成的一些列實(shí)驗,在其中感受到了很多平時(shí)和課上很少遇到的東西,有自主,有探索,有反思,有合作

  短暫的實(shí)習轉眼而過(guò),回顧實(shí)習生活,我在實(shí)習的過(guò)程中,既有收獲的喜悅,也有一些遺憾。喜悅是我們都在老師的指導下自主設計了方案并分工鮮明,合理掌握每一步實(shí)驗用時(shí)及時(shí)、準確測量數據,最終都得到了相應的結果。而遺憾那就是對實(shí)驗有些方面的認識僅僅停留在表面,只是在看人做,聽(tīng)人講如何做,未能夠親身感受、具體處理一些工作,所以未能領(lǐng)會(huì )其精髓。但時(shí)通過(guò)實(shí)習,加深了我對實(shí)驗和微生物基本知識的理解,豐富了我的微生物實(shí)驗的知識,使我對實(shí)驗有了深層次的感性和理性認識。認識到要做好實(shí)驗,既要注重理論知識的學(xué)習,更重要的是要把實(shí)踐與理論兩者緊密相結合。更進(jìn)一步體會(huì )到了“實(shí)踐是最好的老師”的深刻意義。

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